EDU法检测CRC细胞增殖实验步骤及结果
该思维导图概述了EDU实验流程,用于评估CRC细胞增殖能力。实验首先以5 × 10⁴个/孔的密度接种CRC细胞于24孔板,培养24小时后,与10 μM EDU缓冲液共同孵育2小时。随后,细胞经4%甲醛固定、PBS洗涤、0.1% Triton X-100透化。最后,加入EdU溶液和Hoechst染核,利用荧光显微镜观察并计数EdU阳性细胞数量,评估细胞增殖,结果呈现于图1D-F、图3A、图6I、L等。整个流程包括细胞接种、EDU孵育、固定透化和染色检测四个主要步骤。
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# EDU法检测CRC细胞增殖实验步骤及结果
## 细胞接种
- 密度:5 × 10⁴个 CRC 细胞
- 培养器皿
- 类型:24孔板
- 培养时间
- 时长:24小时
## 处理步骤
- 孵育
- 液体:10 μM EDU缓冲液
- 环境:CO₂培养箱
- 时长:2小时
## 固定与透化
- 固定
- 溶液:4%甲醛
- 方法:固定细胞
- 时长:15分钟
- 洗涤
- 溶液:PBS
- 目的:去除多余试剂
- 透化
- 溶液:0.1% Triton X-100
- 目的:增加细胞膜通透性
- 时长:10分钟
## 染色与检测
- 加入EdU溶液
- 目的:标记增殖细胞
- 使用Hoechst染核
- 目的:染色细胞核
- 检测
- 方法:荧光显微镜
- 步骤:拍摄细胞图像
## 评估细胞增殖能力
- 方法
- 计数:EdU阳性细胞数量
- 结果呈现
- 图示:图1D-F、图3A、图6I、L等
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